Tinción de Wright. (PX).
Introducción:
-El colorante de Wright es una solución de esoina y una mezcla de azul de metileno (del 50 al 75%) y azul B (del 10 al 25%)junto con otros derivados delalcohol metílico. En esta práctica las celulas deberían de verse igual de coloreadas que con la tinción de Giemsa.
Material:
-Microscopio.
-Cristalizador y soporte de portas.
-Pipetas Pasteur.
-Frasco lavador.
-Tubos de ensayo.
Muestra:
-Sangre capilar o venosa anticoagulada.
Reactivos:
-Solución de eosina-azul de metileno según Wright.
-Solución pH 7,2.
-Aceite de inmersión.
Fundamento:
-En esta práctica intentaremos lograr una visión clara de los distintos componentes de la sangre, asi como eritrocitos, linfocitos, plaquetas... gracias a la tinción de Wright.
Procedimiento:
1. Realizar una extensión sanguínea y dejarla secar.
2. Colocamos la extensión en el soporte de portas sobre el cristalizador y cubrir la muestra con 1ml de eosina-azul de metileno, dejamos actuar un minuto y lavamos con solución tampón pH 7,2, eliminamos el exceso y dejamos secar verticalmente.
3. En un tubo de ensayo diluimos 0,5ml de eosina-azul de metileno con 0,5ml de solución tampón pH7,2.
4. Cubrimos la muestra con esta mezcla y dejamos actuar entre tres y cinco minutos.
5. Lavar la muestra con agua destilada y otra vez con solución tampón pH 7,2, eliminamos el exceso y dejamos secar verticalmente.
6. Colocamos un cubre en la extensión para poder echarle una gota de aceite de inmersión y mirar a microscopio con 100x como objetivo.
Interpretación de los resultados:
Al igual que en la tinción de Giemsa, se deben observar las distintas fracciones de la sangre, tales como glóbulos rojos, plaquetas y glóbulos blancos, pero al estar utilizando sangre de la bolsa, no se pueden observar leucocitos.
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