Recuento de hematíes. (PXII).
Introducción:
-El recuento de hematíes consiste en la determinación del número de eritrocitos presentes en un volumen determinado de sangre.
Material:
-Una pipeta diluidora de Thoma, para recuento de glóbulos rojos.
-Un tubo de goma con boquilla, adaptable a la pipeta diluidora.
-Una cámara de recuento, con un retículo tipo Neubauer.
-Un cubre.
-Un microscopio.
Muestra:
-Sangre capilar o sangre venosa anticoagulada.
Reactivos:
-Líquido de dilución, debe ser isotónico con el plasma, para evitar la alteración morfológica e incluso la lisis de los hematíes., el más utilizado es el de Hayem, que se compone de las siguientes sustancias:
-2,5g de sulfato sódico.
-0,5g de cloruro sódico.
-0,25g de cloruro mercúrico.
-100ml de agua destilada.
Si contiene precipitados, antes de usarlo deberá ser filtrado.
Fundamento:
-Para el recuento en cámara de glóbulos rojos, se diluye la sangre en un líquido apropiado y posteriormente se deposita en la cámara de recuento, donde se cuentas las células presentes en algunos cuadrados de uno de los retículos.
Procedimiento:
1. Sellar un cubre sobre el retículo de la cámara humedeciendo las bandas laterales de la cámara de recuento.
2. Con la pipeta diluidora, absorber sangre hasta 1.
3. Limpiar con cuidado la punta de la pipeta con un algodón y sin hacer bajar el nivel de la sangre.
4. Seguidamente aspirar líquido diluyente hasta la señal 101.
5. Quitar el tubo de goma y homogenizar el contenido moviendo la pipeta con cuidado durante dos o tres minutos.
6. Desechar las tres primeras gotas y depositar la cuarta entre la cámara y el cubre.
7. Dejar reposar la sangre unos minutos para que las células presentes puedan sedimentarse.
8. Enfocar el retículo con el objetivo de 40xy verificar que la distribución de los ematíes es homogénea.
9. Contar los hematíes presentes en 80 cuadros pequeños del cuadro grande central(5 cuadrados medianos del cuadro grande central), solo se cuentan los hematíes contenidos dentro del cuadrado y los que están en contacto con las líneas de demarcación superior o derecha y se sigue un orden en zig-zag.
Interpretación de los resultados:
-Sabiendo que el cuadrado grande central tiene 5 cuadrados medianos, la longitud de cada lado del cuadrado grande central es de 1mm, la longitud des espacio entre ducho cuadro y el cubre es de 0,1 mm y que la dilución dela sangre previa al recuento es de 100:
RBC=H·5·10·D
RBC= Recuento de hematíes por mm cúbico de sangre.
H= Hematíes contados en cinco cuadrados medianos.
D= Factor de dilución.
RBC= 573·5·10·100=2865000
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