Tinción de Giemsa.(PIX)
Introducción:
Con esta tinción obtenemos una tinción diferencial, capaz de discriminar entre las distintas estruccturas celulares según se tiñan estas con el colorante ácido, con el básico o con la mezcla de los dos.
Material:
-Dos portaobjetos.
-Cristalizador y soporte.
-Pipetas pasteur.
-Frascos lavadores.
-Tubos de ensayo.
Muestra:
- Sangre capilar o venosa anticoagulada.
Reactivos:
-Colorante en solución según Giemsa de Panreac.
-Solución tampón pH 7,2 de Panreac.
-Metanol.
-Aceite de inmersión.
Fundamento:
-En esta práctica intentaremos lograr una visión clara de los distintos componentes de la sangre, asi como eritrocitos, linfocitos, plaquetas... gracias a la tinción de Giemsa.
Fundamento:
-En esta práctica intentaremos lograr una visión clara de los distintos componentes de la sangre, asi como eritrocitos, linfocitos, plaquetas... gracias a la tinción de Giemsa.
Procedimiento:
1. Preparar una extensión sanguínea.
2. Dejamos reposar el porta con la extensión en el soporte sobre el cristalizador y cubrir la muestra de metanol, durante tres minutos.
3. Eliminamos el exceso de metanol y dejamos secar.
4. Mezclamos en un tubo de ensayo 0.2 ml de azul de metileno según Giemsa y 2 ml de solución tampón pH 7.2.
5. Con la ayuda de una pipeta pasteur cubrir la muestra de esta solución, dejando actuar durante 25 minutos.
6. Eliminamos el exceso y lavamos con agua destilada y posteriormente con tampón pH 7.2, dejamos secar en posición vertical.
7. Una vez seca la tinción echamos una gota de aceite de inmersión y examinamos al microscopio con el objetivo de 100x y observar a microscopio.
Interpretación de los resultados:
Los eritrocitos se tiñen de color rosa y las plaquetas de color violeta.
Los neutrófilos presentan el núcleo de color azul violeta, el citoplasma rosa y la granulación de un color violeta rojizo.
Los eosinófilos se observan con el núcleo azul violeta, el citoplasma azul y los gránulos de color rojo anaranjado.
Los basófilos presentan un núcleo de color púrpura y granulación de color azul oscuro.
Los monocitos y linfocitos se observan con un núcleo de color violeta y el citoplasma azul, un poco más claro que el monocito.
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